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                        大鼠ELISA試劑盒的應按規定

                        2024-05-21 [225]

                               大鼠ELISA試劑盒屬固相免疫測定,抗原、抗體的結合只在固相表面上發(fā)生。以抗體包被的夾心法為例,加入板孔中的標本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結合的機會(huì ),只有貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個(gè)逐步平衡的過(guò)程,因此需經(jīng)擴散才能達到反應的終點(diǎn)。在其后加入的酶標記抗體與固相抗原的結合也同樣如此。這就是為什么大鼠ELISA試劑盒反應總是需要一定時(shí)間的溫育。 

                              

                        大鼠ELISA試劑盒

                                溫育常采用的溫度有43℃、37℃、室溫和4℃(冰箱溫度)等。37℃是實(shí)驗室中常用的保溫溫度,也是大多數抗原抗體結合的合適溫度。在建立通用大鼠ELISA試劑盒法作反應動(dòng)力學(xué)研究時(shí),實(shí)驗表明,兩次抗原抗體反應一般在37℃經(jīng)1-2小時(shí),產(chǎn)物的生成可達。為加速反應,可提高反應的溫度,有些試驗在43℃進(jìn)行,但不宜采用更高的溫度??乖贵w反應4℃更為,在放射免疫測定中多使反應在冰箱中過(guò)夜,以形成zui多的沉淀。但因所需時(shí)間太長(cháng),在大鼠ELISA試劑盒中一般不予采用。

                               保溫的方式除有的通用大鼠ELISA試劑盒儀器附有特制的電熱塊外,一般均采用水浴,可將大鼠ELISA試劑盒板置于水浴箱中,大鼠ELISA試劑盒板底應貼著(zhù)水面,使溫度迅速平衡。為避免蒸發(fā),板上應加蓋,也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔,此時(shí)可讓反應板漂浮在水面上。若用保溫箱,大鼠ELISA試劑盒板應放在濕盒內,濕盒要選用傳熱性良好的材料如金屬等,在盒底墊濕的紗布,后將通用大鼠ELISA試劑盒板放在濕紗布上。濕盒應先放在保溫箱中預溫至規定的溫度,特別是在氣溫較低的時(shí)候更應如此。無(wú)論是水浴還是濕盒溫育,反應板均不宜疊放,以保證各板的溫度都能迅速平衡。室溫溫育的反應,操作時(shí)的室溫應嚴格限制在規定的范圍內,標準室溫溫度是指20-25℃,但具體操作時(shí)可根據說(shuō)明書(shū)的要求控制溫育。室溫溫育時(shí),大鼠ELISA試劑盒板只要平置于操作臺上即可。應注意溫育的溫度和時(shí)間力求準確。為保證這一點(diǎn),一個(gè)人操作時(shí),一次不宜多于兩塊板同時(shí)測定。

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